Effects of metformin and ganirelix on subcutaneous endometriosis mouse model on autophagy-related cell death

¹Department of Obstetrics and Gynecology, Sivas Numune Hospital, Sivas, Turkey
²Department of Obstetrics and Gynecology, Urfa Training and Research Hospital, Urfa, Turkey
³Department of Obstetrics and Gynecology, Sivas Cumhuriyet University Faculty of Medicine,Sivas, Turkey
⁴Department of Obstetrics and Gynecology, Sivas Cumhuriyet University Faculty of Medicine, Retired, Sivas, Turkey
⁵Department of Biology, Sivas Cumhuriyet University Science Faculty, Division of Moleculer Biology, Sivas, Turkey
⁶Department of Histology & Embryology, Aydın Adnan Menderes University Faculty of Medicine, Aydın, Turkey
⁷University of Health Science Turkey, Sultangazi Haseki Training and Research Hospital, Clinic of Obstetrics and Gynecology, Istanbul, Turkey

Objective: This study aims to investigate the efficacy of metformin and ganirelix on subcutaneous endometriotic tissues created in an experimental mouse model.
Materials and Methods: Five groups were formed, with 8 animals in each group. One of the groups was set as the control group. Endometriotic lesions were created by transplanting 40 mouse autologous endomyometrial tissues into the mouse subcutaneous tissue to a highly vascular surface. Gene expression analyzes of tissues were performed as HIF-1a, ATG5, ATG12, Beclin2, Beclin1, LC3BII, CateninB, GSK3b, TCF, WNT2, WNT7a, WNT10a gene analyzes. Drug effects were examined by histologic examination. HIF1a and WNT2 protein expressions were examined immunohistochemically. Gene expression coefficients of control, metformin day 1 (Met1g), metformin day 7 (Met7g), ganirelix day 1 (Gnx1g), and ganirelix day 7 (Gnx7g) groups were shown in tables. Data were presented as mean and standard error.
Results: Beclin2 gene expression coefficients of metformin 1st day, metformin 7th day, genirelix 1st day and general 7th day groups were found to have significantly decreased compared to the control group coefficient. Beclin1 gene expression coefficients of metformin 1st day, metformin 7th day, genirelix 1st day, genirelix 7th day groups were found to have significantly decreased compared to the control group coefficient. LC3BII gene expression coefficients of metformin 1st day and metformin 7th day groups were found to have significantly decreased compared to LC3BII gene expression coefficients of control, genirelix 1st day, and genirelix 7th day groups. These findings were supported by histologic and immunohistochemical staining.
Conclusion: These genes are actively involved in the autophagy pathway, we think that the use of metformin in endometriosis might create an autophagy-based suppression mechanism.

Keywords:

Otofaji ile ilişkili hücrelerde subkutan endometriozis fare modelinde metformin ve genireliksin etkisi

¹Sivas Numune Hastanesi, Kadın Hastalıkları ve Doğum, Sivas, Türkiye
²Urfa Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Kadın Hastalıkları ve Doğum, Urfa, Türkiye
³Sivas Cumhuriyet Üniversitesi Tıp Fakültesi, Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı, Sivas, Türkiye
⁴Sivas Cumhuriyet Üniversitesi Tıp Fakültesi, Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı, Emekli, Sivas, Türkiye
⁵Sivas Cumhuriyet Üniversitesi Fen Fakültesi, Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı, Sivas, Türkiye
⁶Aydın Adnan Menderes Üniversitesi Tıp Fakültesi, Histoloji & Embriyoloji Ana Bilim Dalı, Aydın, Türkiye
⁷Sultangazi Haseki Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Sağlık Bilimleri Üniversitesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı, İstanbul, Turkey

Amaç: Bu çalışmanın amacı, deneysel bir fare modelinde oluşturulan deri altı endometriotik dokular üzerindeki metformin ve ganirelix'in etkinliğini araştırmaktır.
Gereç ve Yöntemler: Her grupta 8 hayvan olacak şekilde 5 grup oluşturuldu. Gruplardan biri kontrol grubu olarak belirlendi. Endometriotik lezyonlar, 40 adet farenin otolog endomyometrial dokusunun fare cilt altı dokusuna vasküler bir yüzeye nakledilmesiyle oluşturuldu. Dokuların gen ekspresyon analizleri HIF1a, ATG5, ATG12, Beclin2, Beclin1, LC3BII, CateninB, GSK3b, TCF, WNT2, WNT7a, WNT10a gen analizleri olarak yapıldı. Histolojik inceleme ile ilaç etkileri incelendi. İmmünohistokimyasal olarak HIF1a and WNT2 protein ifadelenmeleri incelendi.
Bulgular: Metformin 1. gün, metformin 7. gün, genireliks 1. gün, genireliks 7. gün gruplarının Beclin2 gen ifadelenme katsayıları kontrol grubu katsayısı ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak azalmış bulundu.Metformin 1. gün, metformin 7. gün, genireliks 1. gün, genireliks 7. gün gruplarının Beclin1 gen ifadelenme katsayıları kontrol grubu katsayısı ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak azalmış bulundu. Metformin 1. gün, metformin 7. gün gruplarının LC3BII gen ifadelenme katsayıları kontrol, genireliks 1. gün ve genireliks 7. gün gruplarının LC3BII gen ifadelenme katsayıları ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak azalmış bulundu. Histolojik ve immünohistokimyasal boyamalar ile bu bulgular desteklendi.
Sonuç: Araştırma kapsamına alınan genler aktif olarak otofaji yolunda yer almaktadır, araştırma bulguları endometrioziste etkin kabul edilen genireliks ile aynı araştırma düzeneğinde incelenen metforminin otofajiye dayalı bir baskılama mekanizması oluşturarak endometriotik odakları baskıladığını desteklemektedir.

Anahtar Kelimeler:

Gamze Sonmez Unal, Yasemin Albak, Nazan Yurtcu, Caglar Yildiz, Meral Cetin, Sevgi Durna Dastan, Erkan Gumus, Ali Cetin. Effects of metformin and ganirelix on subcutaneous endometriosis mouse model on autophagy-related cell death. . 2023; 20(3): 0-0

Corresponding Author: Gamze Sonmez Unal, Türkiye