The effect of intravitreal Bevacizumab on apoptosis of rat retina cells

Kayıkçıoğlu, Özcan; Vatansever, Seda; Topçu, İsmet; Aydemir, Işıl; Bilecenoğlu, Tuğçe; Kahvecioğlu, Fatih; Emre, Sinan

Özcan Kayıkçıoğlu¹, Seda Vatansever², İsmet Topçu³, Işıl Aydemir², Tuğçe Bilecenoğlu⁴, Fatih Kahvecioğlu⁴, Sinan Emre¹

¹Celal Bayar University Faculty Of Medicine, Dept Of Ophthalmology, Manisa
²Celal Bayar University Faculty Of Medicine, Dept Of Histology And Embryology, Manisa
³Celal Bayar University Faculty Of Medicine, Dept Of Anesthesia And Reanimation, Manisa
⁴Celal Bayar University Faculty Of Medicine Students, Manisa

Purpose: To investigate apoptotic effects of intravitreal bevacizumab on the rat retinal cells.
Material and Method: Thirty-six male adult Swiss-albino rats were randomly divided into two groups. The first group was applied 0.25 mg bevacizumab in 0.01 ml saline, and the second group received same amount of saline intravitreally. Each group was divided into 3 subgroups. Animals were sacrificed and globes were enucleated at 3rd, 24th, and 72nd hours of the experiment. Enucleated eyes were preserved for histologic analysis, immunohistochemical analysis of caspase-3, caspase-8, caspase-9, Fas/Fas L, VEGF and VEGF receptors (Flt-1, Flk-1) and TUNEL staining.
Results: Histological evaluation showed no sign of retinal toxicity in both groups. In TUNEL staining, TUNEL(+) cells were detected in all subgroups, but the number of positive cells was relatively lower in bevacizumab treatment group that reached statistically significant level at 24 and 72 hours of treatment (p<0.001). Immunohistochemical analysis revealed that in saline treated subgroups immunoreactivity was more pronounced for all apoptosis induction proteins compared to bevacizumab treated group. Also immunoreactivity of VEGF was prominent in saline treated group. For VEGF receptors, staining was only positive for Flt-1 at 3rd hour in the control group.
Discussion: Bevacizumab did not have apoptotic induction potential compared to control group that was documented with TUNEL and immunohistochemical stainings in short term.
Key words: Apoptosis, bevacizumab, caspase, VEGF

Keywords:

İntravitreal Bevacizumabın sıçan retina hücrelerinde apoptozis üzerine etkileri

Özcan Kayıkçıoğlu¹, Seda Vatansever², İsmet Topçu³, Işıl Aydemir², Tuğçe Bilecenoğlu⁴, Fatih Kahvecioğlu⁴, Sinan Emre¹

¹Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Göz Hastalıkları Ad, Manisa
²Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Histoloji Embriyoloji Ad, Manisa
³Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Anestezi Ve Reanimasyon Ad, Manisa
⁴Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Öğrencileri, Manisa

Amaç: Sıçan retina hücrelerinde intravitreal bevacizumabın apoptotik etkilerinin incelenmesi
Gereç ve Yöntem: Otuz altı erişkin erkek İsviçre-Albino sıçan randomize olarak iki gruba bölündü. İlk gruba 0,01ml salin içinde 0,25mg bevacizumab, ikinci gruba aynı miktar salin intravitreal olarak uygulandı. Her grup üç alt gruba ayrıldı. Hayvanlar deneyin 3, 24 ve 72inci saatlerinde feda edildi ve göz küreleri enüklee edildi. Enüklee gözler histolojik analiz, kaspaz-3, kaspaz-8, kaspaz-9, Fas/Fas L, VEGF ve VEGF reseptörleri (Flt-1, Flk-1) ve TUNEL boyama için hazırlandı.
Sonuçlar: Histolojik değerlendirme her iki grupta da retinal toksisite işaretleri göstermedi. TUNEL boyamada, TUNEL (+) hücreler tüm alt gruplarda izlendi, ancak pozitif hücre sayısı bevacizumab tedavi grubunda tedavinin 24 ve 72 inci saatlerinde istatistiksel anlamlı düzeye erişecek derecede göreceli olarak daha düşüktü (p<0,001). İmmünhistokimyasal analizler sonucunda salin ile tedavi gören alt gruplarda apoptoz indükleyen proteinlerin immünreaktivitesinin bevacizumab uygulanan gruba göre daha belirgin olduğu ortaya çıktı. VEGF immünreaktivitesi de salin uygulanan grupta belirgindi. VEGF reseptörleri için boyanma sadece Flt-1 için kontrol grubunda üçüncü saatte pozitifti.
Tartışma: Bevacizumab kontrol grubu ile karşılaştırıldığında TUNEL ve immünohistokimyasal boyamalarda kısa dönemde apoptotik indüksiyon potansiyeline sahip değildir.
Anahtar Kelimeler: Apoptozis, bevacizumab, kaspaz, VEGF

Anahtar Kelimeler:

Özcan Kayıkçıoğlu, Seda Vatansever, İsmet Topçu, Işıl Aydemir, Tuğçe Bilecenoğlu, Fatih Kahvecioğlu, Sinan Emre. The effect of intravitreal Bevacizumab on apoptosis of rat retina cells. . 2013; 43(1): 39-44

Corresponding Author: Özcan Kayıkçıoğlu, Türkiye